Tobey Maguire : Peter Parker/ Spider-Man

Kirsten Dunst : Mary Jane Watson

James Franco : Harry Osborn/ Nouveau Bouffon Vert

Alfred Molina : Otto Octavius/ Docteur Octopus

Willem Dafoe : Norman Osborn

Topher Grace : Eddie Brock/ Venom

Thomas Haden Church : Flint Marko/ Sandman

J.K. Simmons : J. Jonah Jameson